多重免疫組化技術(shù)（mIHC）近兩年發(fā)展迅速，已經(jīng)展示出強大的臨床轉(zhuǎn)化能力，解決了在同一張切片上進行多種生物標(biāo)志物檢測及共定位的難題。
mIHC在一張組織樣本上復(fù)染多種分子標(biāo)記，將多元信息呈現(xiàn)在同一畫面內(nèi)，配合特定軟件進行全面分析，原位評估免疫細胞表型，獲得各靶標(biāo)數(shù)量、密度、百分比等數(shù)據(jù)，探尋組織微環(huán)境中的目標(biāo)分子或不同類群細胞間的相互關(guān)系。這對于研究疾病的發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移機制，探討疾病診斷和治療具有重要意義。
Principle
TSA技術(shù)（Tyramide Signal Amplification，酪胺信號放大）利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白進行高密度原位標(biāo)記，提高檢測的靈敏度，大幅提高信噪比。TSA信號不受微波法影響，并能在抗體去除后保留信號，同時由于共價鍵結(jié)合方式，熒光探針結(jié)合穩(wěn)定。在微波法處理后，即可進行下一輪染色檢測，無需擔(dān)心上一輪染色中抗體的干擾。因此，TSA技術(shù)可以使用同一種屬來源的一抗進行多色標(biāo)記，每一輪染色換用不同熒光標(biāo)記，對組織切片樣本多重染色。
Advantages
免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性
在應(yīng)用免疫組化的起始階段，由于技術(shù)上的限制，只有直接法、間接法等靈敏度不高的技術(shù)，當(dāng)時抗體只能稀釋幾倍至幾十倍；現(xiàn)在由于TSA信號放大功能，利用少量抗體仍可在細胞中與抗原結(jié)合，超高靈敏度的抗原抗體反應(yīng)使得多重免疫組化方法越來越多的應(yīng)用到病理診斷工作中
該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)和呈色反應(yīng)，可在組織和細胞中進行抗原的準(zhǔn)確定位，可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，對病理學(xué)的深入研究具有十分重要的意義
同一組織可選用多種不同組合的生物標(biāo)志物，為臨床研究提供多種選擇方案
Process
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